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PCR洁净实验室

日期:2021-07-27

PCR实验指的是基因扩增实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法,PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:乙型肝炎,禽疫病、艾滋病检测,癌基因的检测和诊断,个体识别,DNA指纹,亲子鉴定及法医物证等。



一、PCR实验室布局

1、PCR实验室原则上分为:①试剂准备区;②样品制备区;③扩增区;④扩增产物分析区,共四个单独的工作区域。并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。

2、不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密连接,需安装物品传递窗。


   

二、实验室各区功能及主要设备

1、试剂准备区:

① 主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。

② 试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。

③ 本区主要设备有冰箱,天平,离心机,加样器,振荡器等。

④ 本区对气流压力的控制,并没有严格的要求,一般为+10Pa。

2、样品制备区:

① 主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。

② 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。

③ 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。

3、扩增区:

① 主要进行DNA扩增项目。

② 已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。

③ 本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。

④ 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。

4、 扩增产物分析区:

① 主要进行扩增产物的测定。

② 本区主要设备有加样器,洗板机、酶标仪和水浴箱等。

③ 本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。


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